TH-Q320非洲猪瘟检测仪是【天合环境】根据市场需求研发的实时检测反应的仪器,主要由基因扩增热循环组件、微量荧光检测光学系统、微电路控制系统、计算机及应用软件组成。
产品特点:
1.体积小,重量轻
整机外尺寸:宽*深*高:235×385×175mm,总重量仅5.7kg
2.升降温速率
采用Marlow公司PCR专用大功率半导体制冷片,在保证100000次循环的寿命条件下,为模块提供更高的升降温速率
3.控温精度
采用全新的控温算法为模块控温提供更高的控制精度和准确度
4.温度均匀性
全新设计的加热体,模拟加热体结构热量分布,为模块提供更好的温度均匀性
5.高激发效率
采用CREE公司的高亮度长寿命LED作为激发光源,以低损耗玻璃光纤作为传导介质,为试剂提供更高的激发光能量
6.高灵敏度
采用欧司朗高灵敏度,高信噪比光电二极管对微弱辐射荧光信号进行采集,为荧光检测提供更高的灵敏度
7.激发采集波段灵活可变
标配四色荧光,荧光波段可根据客户需求进行选择,光谱波段更灵活,更好地匹配各厂家的荧光染料与探针
非洲猪瘟检测仪操作步骤:
1、病毒DNA的提取(使用A盒)
(1)待检样品、阳性对照和阴性对照的份数总和用n表示,取n个灭菌的1.5 mL离心管,逐管编号。
(2)每管加入BufferA500mL。
(3)每管分别加入已处理的待检样品、阳性对照、阴性对照各200mL,充分混匀,室温放置10分钟。
(4)取与上述离心管等量的DNase-Free吸附柱和收集管,编号。将离心管中的溶液转移至DNase-Free吸附柱,(为避免堵塞吸附柱,尽量不要吸悬浮杂质)。
(5)用高速离心机设置13000 r/min室温离心30秒。
(6)弃去收集管液体,将吸附柱放回收集管中。
(7)吸附柱内加入600 μL Buffer B,13000 r/min离心30秒。
(8)弃去收集管液体,将吸附柱放回收集管中。
(9)重复步骤(7),(8)。
(10)13000 r/min空柱离心2分钟,去除残留液。
(11)将每个吸附柱分别移入新的1.5mL离心管中,向柱中央加入50μL Buffer C,室温静置1分钟,13000 r/min离心30秒,离心管中液体即为模板DNA。获得的DNA溶液,冰上保存备用(注意提取的DNA须在2h内进行PCR扩增,若需长期保存须放置-80℃冰箱,但应避免反复冻融)。
2、荧光PCR扩增(使用B盒)
(1)从试剂盒中取出荧光PCR反应液、Taq酶,室温融化后,2 000 r/min离心5秒。设所需PCR管数为n(n = 样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系需要20 μL 荧光PCR反应液和0.5 μL Taq酶。计算好各试剂的使用量,加入一适当体积小管中,充分混合均匀后,向每个PCR管中各分装20μL。
(2)分别向上述PCR管中加入(11)中制备的DNA溶液各5μL,盖紧管盖,500 r/min 离心30秒。
(3)将加样后的PCR管放入荧光PCR检测仪内,作好标记。反应参数设置:
第一阶段,预变性95℃/3分钟
第二阶段,95℃/15秒,52℃/10秒,60℃/35秒共45个循环。荧光收集在第二阶段每次循环的60℃延伸时进行。